Silica硅膠色譜柱的維護與使用

    為獲得最長的柱壽命，應避免使用不互溶的或有害的流動相。在選擇和配制流動相時，應考慮下面幾點：

    1、決不要用不相溶的溶劑依次通過色譜柱。

    確保即將泵入柱中的溶劑及目前在柱中的溶劑*相溶，否則必須泵入一種或多種互溶的中間溶劑于柱中，以免產生高壓。

    2、在流動相中只用純溶劑。

    制備流動相時，必須用高純(HPLC級)溶劑。緩沖鹽及離子對試劑中存在的痕量污染物在其它應用中可能不會產生問題，但若用于HPLC流動相中，則會導致嚴重的結果。使用不純流動相會產生基線漂移或出現(xiàn)污染峰，特別是采用梯度洗脫時。痕量雜質也會吸附于柱頭上，導致分辨率下降及柱壽命縮短。所有溶劑使用前都必須過濾并脫氣。

    3、注意一旦加入有機溶劑時緩沖溶液可能出現(xiàn)沉淀。

    當在流動相中使用緩沖液、離子對試劑或其它鹽時，應注意有機物含量增加時會出現(xiàn)沉淀。

    4、不要使用能與鍵臺相或硅膠發(fā)生化學反應的流動相。

    大多數(shù)情況下，HPLC中使用的鍵合相相當穩(wěn)定，一般而言，硅氧鍵將官能團鍵合至硅膠粒上，強酸條件下可能會出現(xiàn)硅氧鍵的水解，故流動相的PH值應保持在2.0(注意：有些色譜柱耐受限可達PH1.0)以上。若必要，也可用到PH2以下，但柱壽命將會縮短.